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      polyplus寶利嘉在轉染試劑上都有哪些類型?

      發布時間: 2019-08-09  點擊次數: 1389次
         polyplus寶利嘉是陽離子化的大分子多聚乙烯亞胺(PEI)及其衍生物,其與外源基因結合形成顆粒狀,與細胞表面的蛋白多糖結合,通過細胞"內吞作用"進入細胞。PEI-復合體具有質子海綿的特性,能吸收溶酶體的H+,在復合體中形成酸性環境使核酸酶失活,保護DNA免受核酸酶的降解。進入細胞后,JetPEI復合體囊泡腫脹破裂,將DNA釋放到細胞質中。
       
        polyplus寶利嘉的基本步驟:
        1、JetPEI溶液2μl和質粒DNA1μg混合5-30分鐘。
        2、將JetPEI-DNA復合體溶液加入到細胞液中(可以在含血清的培養基中)。
        3、檢測:N/P比率(影響轉染效率的關鍵)
        N/P比率是對JetPEI復合體的所帶電荷的度量。它指的是DNA分子帶負電的磷酸基團與JetPEI中N殘基的摩爾比,是衡量核酸與轉染試劑比例的參數。從理論上講,JetPEI/DNA復合體的電中性為N/P=2-3,但實際操作時,N/P=5-10效果較好。
       
        polyplus寶利嘉的轉染試劑的類型:
        1、JetPEI轉染試劑:JetPEI是PolyPlus-transfection的主導產品,毒性低,對細胞不會造成傷害。它能把基因轉入各種粘附或懸浮的細胞系中以及原代細胞。
        2、Invivo-JetPEI轉染試劑:通過靜脈、大腦、腹膜以及氣管等體內途徑進行轉染,目前已在小鼠、大鼠、鴨、豚鼠和猴等動物身上取得成功。
        3、TaggedJetPEIs:細胞介導的轉染試劑
        TaggedJetPEIs是偶聯有配體的PEI衍生物,可將基因轉入特殊的細胞。
        A、JetPEI-Gal&invivo-JetPEI-Gal(肝細胞介導)
        PEI衍生物,偶聯有半乳糖。受體細胞:細胞表面表達半乳糖特異性膜血凝素的細胞,如肝細胞。
        B、JetPEI-Man&invivo-JetPEI-Man(樹突狀細胞和巨噬細胞)
        PEI衍生物,偶聯有甘露糖。受體細胞:細胞表面表達甘露糖特異性受體的細胞,如巨噬細胞和樹突狀細胞。
        C、JetPEI-RGD(上皮細胞和內皮細胞)
        PEI衍生物,偶聯有RGD肽鏈。受體細胞:細胞表面表達整合素的細胞,如上皮細胞和內皮細胞。
        4、FluoJetPEI:熒光轉染試劑
        A、JetPEI-FluoF:PEI衍生物,偶聯熒光素FluoF,通常用于胞內定位研究,適于熒光顯微鏡和流式細胞儀的檢測。
        B、JetPEI-FluoR:PEI衍生物,偶聯四甲基羅丹明FluoR,常用于雙色標記和協同定位的實驗中,如用于綠色熒光蛋白或FITC標記的質粒的轉染。
        C、Invivo-JetPEI-FluoF&Invivo-JetPEI-FluoR:PolyPlus-transfection也提供體內轉染的熒光試劑,常用于生物分布研究。
        5、JetPEI-Biotin和invivo-JetPEI-Biotin:PEI衍生物,偶聯Biotin,通過鏈親和素檢測JetPEI/DNA在細胞內的定位和分布。
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